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首頁-技術文章-Northern 和 Southern Blotting,以及 Colony 和 Plaque Lifts

Northern 和 Southern Blotting,以及 Colony 和 Plaque Lifts

發布時間:2023-03-31       點擊次數:533

將載有 pUC19 或 pLH2(2.0 kbp λ 噬菌體 DNA Hind III 片段克隆至 pUC19)的 JM109 混合細菌懸浮液置于瓊脂培養皿中,在 37°C 下培養過夜。 將培養皿在 4°C 下冷卻30 分鐘,將菌落(直徑大約 1– 2 mm)轉印至一片 82 mm 直徑的 Immobilon-Ny+ 圓片膜上,或轉印至競爭產品帶正電的尼龍膜上。 膜上的 DNA 在 254 nm, 60,000 μJoules/cm2 紫外光照射下 交聯。 然后用 a 32P 標記的 DNA 探針對膜進行雜交,并使用磷屏成像系統顯色。

Immobilon-NC 轉印膜

Immobilon-NC 轉印膜是一種經濟型選擇,用于核酸和蛋白質印跡實驗方案。 這種轉印膜是 Southern、colony/plaque 以及蛋白質實驗方案中zui初使用的膜。 NC HATF 所含的混合纖維素酯基質,不含在細胞生長過程中會干擾細胞壁完整性的表面活性劑。 這些膜用于 colony lifts。 NC HAHY 所含的混合纖維素酯基質,所帶的表面活性劑能夠增強可濕性以及轉印過程中的處理能力。 兩種膜對核酸和蛋白質都具有高吸附容量。 適用于常規轉印。

TEL:15216781845